1.1 采样新鲜
采样原则主要是样品新鲜、有代表性。尽量避免在发病后期采样。在不能确定发某种病的情况下,病料的选择要全面。如果从死亡动物尸体上采集样本要注意死亡时间:夏天应少于6h,冬天最长不能超过24h。
1.2 防污消毒
减少污染,做尸体剖检时,应将尸体浸泡在消毒液中,防止羽毛、皮屑飞扬对病料造成污染。
1.3 及时采样
尸体剖开腹腔时,应第一时间采集病料,因肠道和空气中的微生物都可能污染病料,难以确诊。
1.4 无菌操作
病料采集时,对采集病料的器械及容器必须提前消毒,以免对病料造成污染。
1.5 处理规范
采样、剖检完毕后对解剖场地及尸体要进行彻底消毒,不能造成二次散毒。病料采集后,应先存放于冰箱1-2小时后,再做微生物检验。
病料采集方法
2.1 组织和实质器官的采集
在选择样品采集部位时,最好采集病变和健康交界部位的组织或脏器。病料的采集必须采用无菌操作。剖开腹腔后,必须注意肠管的完整。如需进行细菌的分离培养,所采集的部位要保持其完整性,便于能够无菌分离。
组织样品
2.2 液体病料的采集
血液、胆汁、脓肿液、渗出物等液体病料,使用灭菌吸管或注射器,经烫烙部位吸取病变组织的液体,将病料注入灭菌的试管中,封口后送检。拭子的采集主要包括:
A:泄殖腔拭子(家禽)
B:拭子(家禽)
C:鼻拭子(家畜)
D:肛拭子(家畜)
E: 阴道拭子(家畜)
用无菌棉签伸入体腔内采集深部样品,进行细菌学、病毒学检测。
2.3 血清的采集方法
A: 用灭菌注射器自鸡的心脏或翅静脉采血2毫升,注入灭菌离心管中摆成斜面,待血液凝固血清析出后,将血清吸出注入另一个灭菌离心管中,备用。
B:猪的静脉和动脉不容易接触到,血样采集有一定难度。临床上为保证采血速度和采血量,主要采用颈静脉和前腔静脉采血。针对不同大小的猪应采用较合适的采血方法:仔猪或保育猪采用前腔静脉采血,母猪和中大猪采取耳静脉或颈静脉采血。
2.4肠道及肠内容的采集方法
A:肠道:选择病变明显部位的肠道,将内容物用灭菌生理盐水冲洗干净,然后将病料放入盛有灭菌的30%甘油盐水缓冲液中送检。亦可将肠管切开,用灭菌生理盐水冲洗干净,然后用烧红的手术刀片烫烙粘膜表面,将接种针插入粘膜层,取少量病料接种于培养基上。
B:肠内容:用烧红的手术刀片烫烙肠道浆膜层,将接种针插入肠道内,吸取少量肠内容,放入试管中或将带有肠内容的肠道两端扎紧,去掉其它部分送检。
2.5 皮肤及羽毛的采集
A:皮肤要选病变部位的边缘,采取少许放入灭菌试管中送检;
B:羽毛也要选病变明显部分,用灭菌的刀片刮取羽毛及根部的少许皮屑,放入灭菌的试管中送检;
C:孵化室的绒毛:用灭菌镊子采取出风口的绒毛3-5克,放入灭菌的试管中送检。